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枳壳饮片麸炒前后香叶醇的含量测定

【摘要】 　　目的建立气相色谱法测定枳壳饮片麸炒前后香叶醇的含量测定方法。方法采用毛细管气相色谱法，FID检测器，DM-WAX毛细管柱(30 mm×0.25 mm×0.25 μm),载气为氮气，丁香酚为内标，柱温采取二阶程序升温，起始温度为140℃，以5℃/min升至180℃，再以4℃/min升至220℃，测定枳壳饮片中香叶醇的含量。结果被测组分能得到有效分离，香叶醇进样量在0.458 2～4.581 6 μg范围内，其峰面积与内标峰面积比对其进样量呈良好线性关系。Y=2.006 2X-0.008，r=0.999 9，加样回收率为99.43%，RSD为1.29%(n=5)。结论该方法灵敏，简便，重现性好，可为枳壳饮片中香叶醇含量测定提供一种参考。

【关键词】 气相色谱法; 枳壳饮片; 香叶醇

Abstract：ObjectiveTo establish a method for determination of geraniol in Fructus Aurantii Praeparata before and after processing.MethodsCapillary GC was adopted.The internal standard method was employed with eugenol as internal standard.The GC system consisted of a flame ionization detector, DM-WAX(30 m×0.25 mm×0.25 μm). Samples were separated with capillary column programmed increased temperature. The initial temperature was kept at 140℃ , then the temperature was raised to 180℃ at the rate of 5℃·min-1and then the temperature was raised to 220℃ at the rate of 4℃·min-1.ResultsThere was a good linearity(r=0.999 9) and geraniol were completely separated. The recovery rate was 99.46%. ConclusionThe method is accurate and sensitive and can be used for determination of geraniol in Fructus Aurantii praeparata.

Key words： Gas chromatography; Fructus Aurantii Praeparata; Geraniol

枳壳为芸香科植物酸橙Citrus aurantium L.及其栽培变种的干燥未成熟果实，具有理气宽中、行滞消胀的功效[1]。前期研究[2～4]表明，枳壳中葡萄内酯在生品中的含量较低，但经麸炒或放置较长时间后其含量升高，葡萄内酯含量升高可能是枳壳中的7-羟基香豆素和香叶醇在酶或其它物质的作用下转化成葡萄内酯，从而使麸炒品或陈枳壳中的葡萄内酯含量升高。对此我们采用香叶醇和7-羟基香豆素纯品在实验室进行了合成实验，葡萄内酯得率较高，其在枳壳中如何转化课题组正在进一步探索。葡萄内酯经药效学证明为枳壳中主要药效成分之一，其作用机制是通过抑制乙酰胆碱酯酶而起到促进胃肠运动的作用。本实验建立了气相色谱法测定枳壳饮片挥发油中香叶醇的含量方法，为了探讨枳壳中香叶醇在枳壳饮片麸炒前后含量与葡萄内酯生成含量的关系，以期为进一步阐明枳壳饮片的炮制机理提供科学依据。

1 仪器与材料

1.1 仪器、试剂岛津GC-2010气相色谱仪，FID检测器，色谱柱为DM-WAX毛细管柱(30 m×0.25 mm×0.25 μm)。SCN-300高纯氮气发生器、SGP-2213低噪音空气泵(北京东方精华苑科技有限公司)。燃气为高纯氢气(99.999%)。香叶醇购于Sigma公司(分装号:1354702 13707199);丁香酚对照品购于中国药品生物制品检定所(批号0725-200008)。醋酸乙酯为分析纯。

1.2 枳壳饮片生品和炮制品枳壳饮片生品和炮制品由浙江中医药大学中药饮片厂提供，经江西中医学院现代中药制剂教育部重点实验室杨武亮老师鉴定。

1.3 麸炒枳壳饮片制备按本课题组正交试验优选出的最佳麸炒工艺制备样品，即将枳壳生饮片(药典用指定药材080717)称重，在底锅温加热达190℃左右时，将麦麸(药∶麦麸 =100∶10)投入锅内炒至冒烟后，投药炒9 min左右，出锅，阴凉处晾晒，放通风处阴干。

2 方法与结果

2.1 色谱条件DM-WAX毛细管柱(30 mm×0.25 mm×0.25 μm);FID检测器温度250℃;进样口温度230℃;柱温140℃，以5℃/min升至180℃，再以4℃/min升至220℃;流速1 ml·min-1;分流比为50∶1;进样量为2 μl。

2.2 试液制备

2.2.1 对照品储备液的制备取香叶醇适量，精密称定适量，加醋酸乙酯制成每毫升含11 mg的对照品溶液。

2.2.2 内标溶液的制备取丁香酚，精密称定适量，加醋酸乙酯制成每毫升含20 mg的内标溶液。

2.2.3 对照品溶液的制备精密吸取对照储备液0.4 ml和内标溶液0.5 ml，置5 ml容量瓶中，用醋酸乙酯稀释至刻度，摇匀。

2.2.4 供试品溶液的制备将样品100 g敲碎后，用挥发油提取器按2005版《中国药典》一部附录水蒸气蒸馏法提取挥发油，经无水硫酸钠脱水后，加入0.1 ml的内标溶液用醋酸乙酯配成1 ml供试品溶液。