1.3.1 标本采集

剖宫产时，在胎盘娩出、宫体及全身未用宫缩剂前，在子宫下段横切口上方中段无菌切取子宫平滑肌组织约1cm×1cm×0.2cm，无菌剪取胎膜组织约2cm×2cm，两份标本均用生理盐水冲净表面血液，立即置入4%多聚甲醛缓冲液。

1.3.2 免疫组化染色检测ETA表达

子宫平滑肌、胎膜组织按免疫组化染色方法固定、脱水、包埋、冠状切片，片厚4mm。然后选取组织结构完整的切片，每间隔20mm取一张，每个标本取3张，按免疫组织化学染色试剂盒操作进行染色。Leica-200细胞图像分析系统观察ETA免疫反应产物，并在同区相同光学条件下各取3个视野拍照(400倍)，Image-Pro Plus 软件计算每张照片的平均OD值。

1.3.3 结果判定

光镜下细胞膜、细胞浆内有棕黄色颗粒为阳性。阳性细胞必需结构清晰、定位好，着色明显高于背景。

1.4 数据统计

所得数据均用SPSS 16.0 软件统计处理。所有数据用x±s表示。

2 结果

在子宫平滑肌、胎膜组织，镜下可见ETA免疫反应阳性产物呈浅黄色或棕黄色颗粒状沉积;定量结果显示，早产感染组与早产非感染组比较，ETA的平均OD值均明显升高(P0.01);而早产非感染组与正常足月组类同(P0.05)(详见表1、图1)。表1 免疫组化检测子宫平滑肌、胎膜组织ETA平均OD值比较

3 讨论

绒毛膜羊膜炎是病原体进入羊膜腔引起羊水、胎膜(羊膜、绒毛膜)、胎盘的感染，又称羊膜腔感染或宫内感染，能致感染性早产，是围生儿、产妇的发病率、死亡率升高的主要原因。深入研究绒毛膜羊膜炎致感染性早产的分子生物机制，有助于为临床的预防和治疗提供新的思路;但由于其机制涉及大量细胞因子、受体的参与、释放等，国内外学者对其认识不一。而本实验通过免疫组织化学染色及图像分析方法，对以上各组孕母子宫平滑肌、胎膜内ETA表达的检测;发现在绒毛膜羊膜炎致感染性早产孕母子宫平滑肌、胎膜内，ETA的表达显着高于早产非感染组及正常足月组。有些作者认为：当孕母宫内发生绒毛膜羊膜炎感染时，绒毛膜细胞能分泌大量的炎性细胞因子 [4~6]，促使子宫平滑肌功能提前激活，大量增多的ETA能与母血中高浓度的ET-1特异结合，激活蛋白激酶C(PKC)，引起子宫平滑肌细胞Ca2+大量内流，胞浆内急剧升高的Ca2+诱发了子宫收缩。本实验证实了早产感染组ETA在胎膜组织中的显着表达，而羊水中又有高水平的ET-1，二者特异结合产生生物学效应，刺激羊膜中前列腺素前身物质的生成，使局部产生前列腺素(PGs，能刺激子宫强力收缩)增多;且已证实，PGs又可通过胎膜组织转运到子宫平滑肌，那么子宫平滑肌内PGs的大量积累可诱发子宫收缩。笔者认为，早产感染组子宫平滑肌、胎膜内ETA异常增高的表达，诱发了子宫强有力的收缩，致分娩发动提前，可能是引起感染性早产的原因之一。但迄今为止，感染性早产的发生分子机制还是一个未阐明的医学问题，且与妊娠相关的激素和细胞因子都可能参与其中，本实验证实ETA的异常增高的表达，通过哪种途径调节，有待进一步研究。

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