2.1方法的线性范围、 相关性及检出限实验

以在血浆空白样品基体中六点添加标准品法制作校正曲线, 7点添加水平分别是0.1ng/mL、0.2ng/mL、0.5ng/mL、1ng/mL、5ng/mL、10ng/mL、20ng/mL。按本文方法进行加标回收试验，结果表明，方法此范围内线性相关，相关系数r=0.9998，当信噪比S/N≥10时，定量下限LOQ为0.1 ng/mL。

2.2方法的精密度和回收率

取空白血浆，分别精确加入适量的阿托伐他汀标准溶液，配制成浓度为0.2 ng/mL、2 ng/mL.10 ng/mL的血浆样品各6份，按1.4步骤处理在同日内重复测定5次，并连续5天测定，计算日内、日间的精密度。得到的日内精密度(RSD%)分别为2.62、3.11、1.97，日间精密度分别为3.55、5.65、4.98。阿托伐他汀0.2 ng/mL、2 ng/mL、10 ng/mL三个水平浓度的测定回收率结果见表2。 表2 空白血浆阿托伐他汀的添加回收率和精密度(n=6)

Table 2 Recoveries and precisions of Atorvastatin at different fortified levels (n=6)

2.3稳定性试验

取空白血浆.精确加入适量的阿托伐他汀标准溶液，分别配制成浓度为0.5ng/mL和2 ng/mL血浆溶液，按“1.4”项下血浆处理方法操作，分别于0、2、4、8、10h时进行色谱分析，记录峰面积。结果，RSD分别为3.56%和4.14%。表明样品血浆溶液在10h内稳定。

图2阿托伐他汀在MRM条件下二种离子的谱图

Fig.2 Two ion chromatograms of Atorvastatin in MRM

2.4实验条件的优化讨论

试验中比较了甲醇—乙酸铵缓冲液、乙腈—乙酸铵缓冲液、甲醇—水和乙腈—水[3-6]四种流动相体系，结果表明，以乙腈—乙酸铵缓冲液作为流动相得到的峰型最好，出峰时间也较稳定。这可能由于水相中甲酸提高了待测物在ESI正离子电喷雾中的离子化效率，乙酸铵则使检测物出峰时间较为稳定。因此本文选择用乙腈—乙酸铵缓冲液作为流动相，得到的谱图峰形的对称、出峰时间和灵敏度均较理想(见图2)。

参 考 文 献

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[3]姜楠，杨永革，许雪廷，等. LC-MS-MS法测定人血浆中阿托伐他汀浓度[J]. 药学实践杂志 2 0 1 1, 2 9(1):15-17.

[4]胡晓玲，李环德.UPLC-MS/MS法测定健康人血浆中的阿托伐他汀浓度及药物代谢动力学研究[J]. 中南药学，2008，6 (4)：400.

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