生物实验高中叶绿体中色素的提取和分离

叶绿体中色素的提取和分离一、教学目的

1.初步掌握提取和分离叶绿体中色素的方法。

2.探索叶绿体中有几种色素。

二、注意事项

 1.取材时要选用新鲜的颜色较深的叶片，以便使滤液中含较多的色素，剪碎叶片前要去

掉叶柄和粗的叶脉,并且尽量将叶片剪得细碎些。

  2.研磨时加入二氧化硅的目的是为了研磨的充分，更有效的破坏细胞结构；加入少许碳酸钙的目的是为了防止在研磨过程中，叶绿素受到破坏。因为叶绿素分子结构中含有一个镁原子，当细胞破裂时，细胞液内有机酸的氢可以取代镁原子而成为褐色的去没叶绿素，碳酸钙可中和有机酸以防止去镁反应的发生，制得的色素提取液,应加盖避光,以免叶绿体中的色素在接触空气或光照下遭到破坏。

   3.研磨时要迅速、充分。一是因为丙酮容易挥发；二是为了使叶绿体完全破裂，从而能提取出较多的色素；二是叶绿素极不稳定，能被活细胞中的叶绿素酶水解而破坏。

   4.制备滤纸条时，要将滤纸条的一端剪去两角。这样可以使色素在滤纸条上扩散均匀，便于观察实验结果，根据烧杯的高度制备滤纸条,让滤纸条长度高出烧杯1 cm,高出的部分做直角弯折。在滤纸条的另一端剪去两角并在离顶端1 cm处画好滤液细线后,将弯折部分用胶水粘在培养皿内顶壁上。

   5.裁取定性滤纸时,尽量注意双手不要接触纸面,以免手上的油脂或其他脏物污染滤纸。画滤液细线时，一定要细且直。这样可以防止色素带重叠，使色素分子均匀分布在一条直线上，做到扩散起点一致。重复划2~3次，是为了增加滤液细线上的色素分子数量，使实验效果更加明显。画滤液细线时,用力要均匀,速度要适中,色素线以3 mm宽效果最佳。

   6.分离色素时，一定不要让滤纸条上的滤液细线接触到层析液，这是因为色素易溶解于层析液中，导致色素带不清晰，影响实验效果。

 7.识记实验结果的色素带分布及宽窄（四种四素扩散速度的先后顺序为：胡萝卜素-----叶黄素----叶绿素a----叶绿素b）

三、基本步骤

选择取材-----材料处理------提取步骤------观察结果。

四、实验结果

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