近年来,运用现代分析技术,对中药质量评价方法进行了大量的研究工作,并取得了可喜的成果。较为常用的分析技术包括光谱、波谱、色谱、核磁共振、X射线衍射及各种技术的联用,尤其对色谱指纹图谱的研究最为广泛、深入。

2.1 薄层色谱指纹图谱

薄层色谱(TLC)法操作简单,分析速度快,但提供信息量有限,对分析含有几十种或上百种化学成分的复杂体系有困难,可作为中药指纹图谱研究的借鉴与补充。而采用了更细更匀吸附剂的高效薄层色谱(HPTLC)因其较好的分离效果,近年来有较为广泛的应用。高氏等[3]对不同产地的何首乌药材进行TLC分析,建立了能区别不同产地何首乌药材的TLC指纹图谱,适用于何首乌药材的质量控制与鉴定。颜氏等[4]对24个批次的三七药材进行研究,建立了三七药材的TLC指纹图谱,能快速有效地评价三七药材的质量。

2.2 高效液相色谱指纹图谱

高效液相色谱(HPLC)具有分离效能高、选择性高、检测灵敏度高、分析速度快等特点,所以,该方法应用范围最为广泛,方法也最为成熟。目前,三七、芦根、蛇床子、牡丹皮、银柴胡、葛根、川芎、丹参、黄芩、天麻、灵芝等原药材及其提取物都建立了指纹图谱,许多学者也对中成药的指纹图谱进行构建,如保济丸、茵陈注射液、玄麦甘桔颗粒等。石氏等[5]采用HPLC法建立了葛根及其提取物的指纹图谱,能有效控制提取物的质量。傅氏等[6]采用梯度洗脱HPLC分析,建立了注射用三七通舒的HPLC指纹图谱,能有效地控制注射用三七通舒的质量。罗氏等[7]采用HPLC法对13批岩黄连注射液进行研究,建立了岩黄连注射液的指纹图谱,能有效地评价其质量。

2.3 气相色谱指纹图谱

气相色谱(GC)主要用于挥发油、极性较小的成分或衍生化后可挥发性成分的分析。该法灵敏度高、分离度好、分析速度快、定量分析的精密度优于1%,其分析范围只局限于低沸点成分,但不失为中药指纹图谱研究的主要方法之一。张氏等[8]采用GC法对16批泽泻药材进行研究,建立了泽泻药材的指纹图谱,能有效反映不同来源泽泻中挥发油的差异。李氏等[9]对野菊花注射液进行研究,建立了指纹图谱,并确定了22个共有峰,为野菊花注射液的质量控制提供了依据。

2.4 毛细管电泳指纹图谱

毛细管电泳(EC)适用于中药带电荷的化合物、有机酸、单糖及一些中性分子的分离分析,特别是大分子物质——肽和蛋白质的分离。但其重现性有待提高,可作为中药指纹图谱研究的补充。苗氏等[10]应用EC技术,对益母草注射液进行分析并建立指纹图谱,可用于其质量控制。

2.5 色谱联用技术

将色谱法较强的分离能力与光谱和波谱法良好的结构鉴别能力相结合,进而采用化学计量学方法进行分析,可对大部分中药的化学成分进行定性和相对定量的分析。目前,用于中药指纹图谱研究最为广泛的联用技术是色谱-质谱(MS)联用技术,HPLC-MS、GC-MS、LC-MS及EC-MS等联用技术都已用于中药质量评价的研究。此外,红外光谱、核磁共振、X射线衍射技术和DNA分子技术由于其各自的特点,在中药指纹图谱的研究中也有较为广泛的应用。仇氏等[11]应用核磁共振技术,对复方人参注射液的中间体和注射液样品进行检测分析,获得了各自标准指纹图谱及特征标记值,建立了复方人参注射液的核磁共振指纹图谱,以控制其质量。郑氏等[12]建立了板蓝根颗粒的X射线衍射Fourier指纹图谱,根据指纹图谱的几何拓扑图形与衍射特征标记峰值,可鉴别出不同厂家生产的板蓝根颗粒。赵氏等[13]采用HPLC-UV/ELSD串联检测技术,对中药复智散进行指纹图谱研究,建立的指纹图谱能同时反映复智散复方中主要化学组分特征,可全面有效地进行质量监控和评价。

3 中药色谱指纹图谱质量评价的应用