3 样品溶液的制备

　　取白花蛇舌草药材粗粉1.0 g，精密称定，置烧瓶中，精密加入50%(体积分数)甲醇20 mL和盐酸1 mL，密塞，称定重量，加热回流2 h，放冷，用50%(体积分数)甲醇补足减失的重量，摇匀，滤过，精密量取续滤液5 mL，置10 mL量瓶中，加甲醇稀释至刻度，摇匀，用微孔滤膜 (0.45 μm) 滤过，取续滤液，即得。

　　2.4 系统适用性试验

　　分别取对照品溶液、供试品溶液各20 μL进样测定，理论塔板数为15 000，供试品溶液色谱图中槲皮素峰与相邻杂质峰的分离度大于1.5。

　　2.5 线性关系的考察

　　精密称取经五氧化二磷干燥过夜的槲皮素对照品10.0 mg，加甲醇定容至100 mL，分别精密量取上述对照品溶液0.4、0.6、0.8、1.0、1.2、1.4、1.6 mL 置10 mL量瓶中，加甲醇稀释至刻度，摇匀，制成系列浓度的溶液。分别精密吸取各溶液20 μL，注入液相色谱仪，记录色谱图。以槲皮素峰面积(A)为纵坐标，槲皮素进样量(m)为横坐标，绘制准曲线，得回归方程为 A=274.79m+54.43，r=0.999 6，结果表明槲皮素在0.08～0.32 μg范围内与峰面积成良好线性关系。

　　2.6 精密度试验

　　取槲皮素对照品溶液20 μL ，重复进样6次分别测定峰面积为2 949，2 911，2 891，2 946，2 950，2 957， RSD为0.9%(n=6)，结果表明精密度良好。

　　2.7 稳定性试验

　　取供试品溶液(批号2006001)，分别在2、4、6、8、10、12 h进样，测得槲皮素峰面积为1 437，1 422，1 451，1 430，1 421，1 425，RSD为0.8%，结果表明供试样品溶液在12 h内稳定。

　　2.8 重现性试验

　　取同一批号的白花蛇舌草5份，按“2.3”制备样品溶液，进行测定，测得槲皮素的峰面积为1 447，1 452，1 425，1 419，1 423，RSD为1.1%(n=5)，结果表明该方法重现性良好。