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关于内毒素和降钙素原在尿路感染中的诊断价值

编辑:sx_zhangjh

2014-05-23

关于内毒素和降钙素原在尿路感染中的诊断价值

尿路感染是泌尿系统常见疾病之一,是由于尿道内大量微生物繁殖而引起一种疾病,如不及时治疗会导致慢性感染。作为诊断尿路感染的金标准,尿细菌培养可提供给临床感染细菌的数量、药物敏感性以及相应的疗效观察。但是尿细菌培养约需要3~4d,不能及时为临床提供治疗依据。尿液内毒素、血清降钙素原(PCT)的联合应用可以及时地给临床医生提供治疗的参考信息。本文通过Sysmex UF?1000i尿沉渣分析仪的检测结果、尿液中内毒素含量和PCT、C 反应蛋白(CRP)与尿细菌培养结果作比较,研究其在尿路感染中的诊断价值,以寻找尿路感染早期、准确的诊断方法,指导治疗。

1 资料与方法

1.1

一般资料 收集本院2011 年10 月至2012 年4 月疑似尿路感染的门诊、住院患者的尿液标本755 例,男468 例,女287例。

1.2

仪器与试剂 济南百博生物技术公司提供的血琼脂平板和中国蓝平板。细菌鉴定仪(VITE K2)为法国生物梅里埃公司产品。北京金山川科技发展公司生产的MB?80微生物动态快速检测系统配套试剂、质控液。罗氏E170 化学发光仪配套试剂、质控液。德国西门子BN?Ⅱ 全自动蛋白仪配套试剂、质控液。日本Sysmex公司生产的UF?1000i尿沉渣分析仪及配套试剂、质控液。

1.3 方法

1.3.1

所有尿液标本按无菌操作的原则留取清洁中段尿约10mL 于无菌试管中并及时送检。男性需清洗尿道口,女性需 ·232· 国际检验医学杂志2013年1月第34卷第2期 IntJLabMed,January2013,Vol.34,No.2清洗外阴后留取标本。收到标本后先做尿细菌培养、尿沉渣分析、尿液内毒素检测,所有标本在2h 以内完成检测。同时抽取患者静脉血进行血清PCT 和CRP检测。

1.3.2

尿细菌培养及鉴定 严格按无菌操作用接种环把1 μL 尿液标本接种到血平板和中国蓝培养基上进行半定量培养,经过18~24h37 ℃ 需氧培养,计数菌落数量。如革兰阳性菌浓度高于104cfu/mL 或革兰阴性菌浓度高于105cfu/mL认为该标本培养阳性。如果生长3种或3种以上细菌,而且没有优势菌,则认为是标本污染[1]。

1.3.3

UF?1000i尿沉渣分析 接种后的尿液标本按照SOP在UF?1000i尿沉渣分析仪上检测,并记录白细胞(WBC)和细菌计数(BACT),保存具有UIT 信息的标本散点图。

1.3.4

血清PCT 罗氏E170化学发光仪检测血清PCT,测定采用免疫化学发光法。

1.3.5

CRP 德国西门子BN?Ⅱ 全自动蛋白仪检测血清CRP,测定采用速率散射比浊法。

1.3.6

尿液内毒素测定 MB?80 微生物动态快速检测系统采用动态浊度法检测尿液中内毒素含量。

1.4

统计学处理 用SPSS12.0统计软件进行统计分析。评价尿液内毒素、血清PCT 初筛尿路感染的灵敏度、特异度、阳性预测值、阴性预测值和准确度,计量资料狓±狊表示,组间比较采用狋检验,显著性检验水准为α=0.05。

2 讨论

近年来,各种介入性诊断和治疗手段明显增多,滥用广谱抗生素的现象仍较严重,导致耐药菌株增加,还有免疫抑制剂应用增多等引起人群机体免疫力下降,临床上尿路感染呈上升趋势。尿细菌培养是诊断尿路感染的金标准,但是尿培养约需要3~4d,不能及时为临床提供治疗依据,而且易受使用抗生素等客观因素的影响,导致结果欠准确、影响治疗效果[3]。辅助诊断尿路感染的快速检查方法主要有:尿沉渣的白细胞计数、细菌计数,干化学的白细胞酯酶和亚硝酸盐等。但是影响结果的因素很多,灵敏度和特异度较低。如何早期预见并筛选出尿路感染以满足临床的需要,并保证结果的可靠性成为检验人员研究的目标。UF?1000i是现在最主要的筛查尿路感染的实验室检查仪器,其有快速简便的特点。单一的尿沉渣检验对诊断尿路感染有局限性,检测结果存在一定的假阴性率和假阳性率,假阳性率可能是由于UF?1000i在尿细菌计数时不能区分活菌和死菌,而尿培养只能培养到活菌;患者服用抗生素导致细菌生长受到抑制;假阴性率可能是由于细菌聚集成簇时被仪器误认为其他颗粒[4]。CRP可以作为鉴别细菌感染的参考指标,但有时在细菌感染早期CRP 不升高,而在其他原因引起的感染时却增高明显,其特异性较低,给临床判断带来很大困难。PCT 是一种糖蛋白,是降钙素的前态,正常情况下由甲状腺C 细胞产生,在健康人血清中PCT 浓度低于0.11ng/mL,不能被检测到。在机体感染产生全身反应时才会产生,在局限性感染和慢性感染时其血清浓度正常或轻度升高,全身性细菌感染时其血浆浓度大幅上升,且与细菌感染的严重性相关,有估计预后的价值[5]。本实验中由于细菌感染引起的尿路感染其尿液WBC、细菌计数、血清CRP、PCT 浓度均有明显的升高,而真菌感染和病原菌培养阴性的患者各项指标变化不大。PCT 的灵敏度81.6%,特异度81.9%,阴性预测值89.6%,灵敏度和特异度都较高,在鉴别细菌性尿路感染上有独特的优势。国际检验医学杂志2013年1月第34卷第2期 IntJLabMed,January2013,Vol.34,No.2 ·233· 内毒素是一种脂多糖,是由革兰阴性菌破坏后释放出的一种毒素,属细菌的外部结构。本文通过研究发现革兰阴性菌是尿路感染的主要致病菌,占尿培养阳性患者的77.7%。当患者泌尿系统感染革兰阴性菌时,其尿中内毒素含量显著增高,灵敏度91.4%,特异度93.7%,阴性预测值90.3%。这时进行其含量测定可以对革兰阴性菌引起的尿路感染作出快速诊断,且不受测定前是否使用抗菌药物的影响[6],从而指导临床早期实施针对病原治疗,有利于取得较理想的疗效。总之,尿路感染患者在没有培养出致病菌和没有药敏结果的情况下,尿液内毒素、PCT 联合尿沉渣分析仪的检测结果对辅助诊断泌尿系统感染有很高的价值,可提高诊断的灵敏度和特异度,并有助于区分尿路感染致病菌的种类。

3 结果

3.1

病原菌培养结果 755份标本中,阳性标本256份,阳性率为33.9%。其中革兰阴性菌199 例(77.7%),革兰阳性菌45例(17.6%),真菌12例(4.7%)。

3.2

尿路感染相关各种指标尿液WBC、细菌计数、内毒素,血清CRP、PCT 的测定结果 由于细菌感染引起的尿路感染其尿液WBC、细菌数、血清CRP、PCT 值均明显高于真菌感染和培养阴性的患者,狋检验均有统计学差异(p<0.01)。尿液内毒素在革兰阴性菌引起尿路感染明显升高,而革兰阳性菌、真菌和培养阴性的患者均变化不明显,狋检验均有统计学差异(p<0.01)。

3.3

尿路感染的诊断效能评价 以尿细菌培养结果为金标准,各种指标对尿路感染的诊断效能评价见。

3.4

尿培养阳性标本256例中尿内毒素阳性患者200 例,占78.1%。其中革兰阴性菌感染者有199例,尿内毒素阳性182例,占91.4% ,革兰阳性球菌和真菌感染者共57例,尿内毒素阳性18例占31.6%。不同病原菌引起的尿路感染尿内毒素试验与尿培养结果的比较。内毒素大于50pg/mL 为cut?off值时[2],其在革兰阴性菌引起尿路感染中灵敏度91.4%,特异度93.7%,阳性预测值89.6%,阴性预测值90.3%,准确度91.3%。

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