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谈人参须超微粉醇提液对去卵巢大鼠血脂的影响

编辑:liuxw

2010-12-30

在当今人口老龄化的趋势下,诸如女性绝经后动脉粥样硬化、冠心病、骨质疏松症等多种老年性疾病的防治日益受人们关注。女性进入更年期后,由于卵巢内分泌功能衰退,雌激素水平下降而导致脂肪和胆固醇代谢失常[1],使绝经女性血脂升高,使心血管疾病发病率和死亡率增加。亦有文献报道以去卵巢大鼠为血脂紊乱模型观察多种中药调节血脂的作用[2,3]。

人参须为名贵中药材、五加科植物人参的细支根及须根,亦有益气活血之功效。有研究发现,人参的主要有效成分人参皂苷对高胆固醇模型大鼠有一定降血脂作用 [4],但由于价格昂贵,从人参中提取皂苷成本较高。人参须价格一般仅为人参的1/l0~1/2,而其总皂苷的含量甚至可以高于人参中皂苷的含量[5]。为进一步开发中药人参,研究其调节血脂、抗动脉硬化机制,为其防治妇女绝经后血脂紊乱及动脉硬化提供药理学依据,本实验采用大鼠去卵巢模型,观察超微粉醇提工艺制备的人参须提取液对去卵巢大鼠血清脂质谱 TG,TC,HDL-c,HDL-c/TC 值等指标以及体重增长量和肝脏、子宫重量的影响。现报道如下。

1 材料与仪器

1.1 药品

人参须超微粉醇提液的制备:人参须,粉碎,用贝利微粉机进行微粉化,70% 乙醇浸泡 24 h ,加热提取 2 h ,过滤,滤渣再加 40% 乙醇浸泡 24 h,加热提取 2 h,过滤,合并滤液,浓缩,至 100%(1g生药/ml)和 33% 两种浓度。

经 HPLC 法检测,中剂量药液(1 g生药/ml)含人参皂苷 Rg1(6.63±0.26)mg/g 生药,人参皂苷Rb1(6.52±0.48 )mg/g 生药, 人参皂苷 Re(8.17±0.38)mg/g 生药。

1.2 试剂

总胆固醇试剂盒(TC)、甘油三酯试剂盒(TG)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-c)试剂盒均为温州东瓯生物工程有限公司产品。

1.3 动物

清洁级成年雌性未孕 SD 大鼠 32 只,体重(271.67±25.63)g,由广东省实验动物中心提供,广东省实验动物质量合格证编号:粤监证字 2006A015 ,北京产大鼠维持期全价饲料饲养,自由摄食、摄水。

1.4 仪器

ELX800 型酶标仪,美国 BIO-Tek 公司产品; WZJ6(BFM6)型贝利微粉机,济南倍力粉技术工程有限公司产品。

2 方法

2.1 模型建立

去卵巢实验时除假手术组外其余各组大鼠以 3% 戊巴比妥钠无菌溶液 0.13 ml·(100 g)-1BW 腹腔注射麻醉,无菌条件下腹部手术切除双侧卵巢后缝合[6],假手术组大鼠只切开肌层进入腹腔寻找出卵巢后不切除并回纳腹腔。手术后观察伤口愈合情况并常规饲养,观察 2 d 后开始作灌胃预防给药。

2.2 分组与给药

32 只大鼠随机分为 4 组,分别为假手术组、去卵巢组、人参须超微粉醇提液中剂量组(GSM)、低剂量组(GSL)每组各 8 只。低剂量组为中剂量(100%即1 g 生药/ml)加两倍体积蒸馏水稀释成 33% 的药液。从去卵巢后 2 d 开始,各预防用药组按 5 ml·(kg·bw)-1·d-1灌胃给药,假手术组及去卵巢组每天给予等量蒸馏水灌胃,连续 90d 。

2.3 指标观察与测定方法

实验过程中每天观察大鼠进食、饮水、活动情况等变化并记录,7 d 称体重 1 次。在实验结束前 1 d 下午开始禁食,实验结束时心脏取血处死大鼠,取血离心收集血清,并剥离子宫、肝脏。酶法上酶标仪比色测血清 TC,TG,HDL-c 浓度,具体步骤均按各试剂盒说明书要求操作,并计算 HDL-c/TC 值。子宫及肝脏重量(湿重)采用称重法,计算子宫/体重比、肝脏/体重比。大鼠体重增长量由实验结束当周体重减去卵巢实验当周体重求得。

2.4 统计学处理

所有测定指标均采用±s表示,使用 SPSS 13.0 for Windows 软件中的单因素方差分析(AN0VA)进行检验,先用 Levene's test 对数据进行方差齐性检验,如方差齐用 Bonferroni 检验,如方差不齐则用 Tamhane's T2 检验,P<0.05表示差异有显著性。

3 结果

3.1 人参须超微粉醇提液对大鼠体重的影响各组体重指标经统计学处理结果如表 1 所见,大鼠切除卵巢后体重增加较快,实验末期去卵巢组大鼠体重明显高于假手术组(P<0.01),体重增长幅度亦明显高于假手术组(P<0.01);和去卵巢组相比,GSM,GSL 组大鼠的体重增长变化无统计学意义,GSM、GSL 组仍高于假手术组(P<0.01)。表1 人参须超微粉醇提液对实验前、后大鼠体重及体重增长量的影响(略)

3.2 人参须超微粉醇提液对大鼠子宫、肝脏重量的影响 各组脏器重量指标经统计学处理结果如表 2 所见,去卵巢组去势大鼠肝脏/体重比明显较假手术组降低 (P<0.01) ;和去卵巢组相比所有预防用药组都使肝重明显增加 (P<0.01);与假手术组相比,各组去势大鼠子宫重量都明显下降 (P<0.01);和去卵巢组相比,所有预防用药组子宫重量无明显差异。表2 人参须超微粉醇提液对大鼠肝脏、子宫体重比的影响(略)

3.3 人参须超微粉醇提液对大鼠血脂水平的影响 各组血清测定上述各项血清谱指标,测定值经统计学处理结果见表3。表3 低、中剂量人参醇提液对去卵巢大鼠血脂水平的影响(略)

与假手术组比较,去卵巢组大鼠血清总胆醇(TC)值明显升高(P<0.01),高密度脂蛋白(HDL-c)值显著降低(P<0.01),HDL-c/TC值亦降低(P<0.05),血清甘油三酯(TG)值虽有所上升,但差异无统计学意义。

与去卵巢组比较,所有人参用药组均能显著降低TC (P<0.01),升高 HDL-c,差异均有显著性(P<0.01或P<0.05),但 HDL-c/TC 值只有 GSM 组明显增高(P<0.01), TG只有GSM组降低(P<0.05)。

4 讨论

4.1 去卵巢大鼠高脂血症可模拟绝经期血脂紊乱本实验发现,去势大鼠体重有明显增加趋势,血清脂质谱指标 TC,TG升高,HDL-c 明显降低。此高脂血症的实验结果和绝经期综合征妇女血脂紊乱的变化一致[2,7],与肥胖倾向的表现都是心血管疾病发生重要的危险因素。此外去势大鼠子宫重量都明显下降,子宫的萎缩提示本实验各组动物去卵巢造模确实造成雌激素降低,手术明确有效。

肝脏是脂质合成的重要场所,大鼠肝脏/体重即肝系数(hepatic index,HI)增高通常反映脂代谢紊乱使肝脏发生脂肪变或肿大[8]。但发现去卵巢大鼠HI下降反映的肝内脂代谢紊乱和病理改变到底如何,还有待作肝脏脂质谱检测及组织形态学观察以进一步分析。

4.2 人参须超微粉醇提液对去卵巢大鼠血脂紊乱有良好调节作用本实验中,低、中剂量的人参须超微粉醇提液均能明显降低血清 TC,升高血清 HDL-c。HDL-c 具有逆向运输胆固醇的作用,减少其在心血管内皮的沉积以防止动脉粥样硬化的发生,因此 HDL-c,HDL-c/TC 值等与冠心病的发病率呈明显负相关[9]。实验结果表明中药人参能升高大鼠血清 HDL-c,有利于胆固醇的清除,对防治高脂血症及心血管疾病有效。另外中剂量的人参醇提液还能升高 HDL/TC 值和降低血清 TG 。最近的临床前瞻性研究发现,反映血脂水平的另外一个重要指标——TG 是男性心血管疾病的独立于 TC 或 HDL-c 等传统危险因素的重要预测因素[10],丹参有效降低 TG 有利于降低各种心血管疾病发病风险。

中剂量人参须超微粉醇提液较低剂量能更好的改善去卵巢大鼠血脂紊乱,提示其调节血脂有一定剂量依赖性。

此外两种人参制剂亦对大鼠子宫湿重影响小,这与其不存在性激素样作用有关,提示其对绝经期妇女子宫的不良反应可能较小。

4.3 人参须超微粉醇提液的皂苷成分是其调节血脂、抗动脉硬化的活性部位群本实验所用的人参醇提液经检验所含人参皂苷成分Rb,Re 较多,而最近有相关文献报道,人参 Rb 以及主要含 Re 的人参果皂苷可能通过调节体内血脂代谢、提高PGI2/TXA2 比值及纠正自由基代谢紊乱发挥抗动脉硬化作用[11,12],这都为人参醇提液有效降血脂和抗动脉硬化提供了证据。

综上所述,人参须超微粉醇提液对去卵巢大鼠血脂紊乱有良好调节作用。随着雌激素替代疗法(estrogen replacement therapy,ERT)的广泛应用,ERT亦带来诸如诱发女性子宫内膜、乳腺发生瘤变等不良反应的影响,开发人参等中药制剂以防治绝经期妇女心血管疾病就显现出其独特的优越性和应用价值。

标签:医药卫生

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