棕叶花(别名冬叶花、柊叶花)Phrynium capitatum Willd (flower)为竹芋科(Marantaceae)多年生本草，分布广西、广东、云南等地。全草可入药。文献记载：“全草味甘淡，性微寒，有清热解毒、凉血、止血和利尿之功效。”广西少数民族民间有用其花治疗月经过多、血崩(功能性子宫出血)及失音等疾病之经验(《广西民族药简编》，1980广西药品检验所印行)。有文章报道棕叶花水提取物对孕或非孕小鼠、大鼠、豚鼠、家兔离体子宫及对家兔在体子宫都有兴奋作用[1]，而关于其他溶剂提取物的药理研究尚未见报道。为了进一步研究其他溶剂提取物对子宫的兴奋作用，本文采用BL-410生物机能实验系统，观察棕叶花正丁醇、水溶性组分两种提取液对非孕或注射乙烯雌酚后家兔、豚鼠、大鼠、小鼠离体子宫的影响，并用EC50与益母草流浸膏进行比较。

1 器材与方法

1.1 受试药物与试剂棕叶花采自南宁地区，晒干备用。受试药物的制备：取干棕叶花750 g用中药材粉碎机粉碎后置10 000 ml圆底烧瓶中加95%乙醇浸没，加热冷凝回流1 h，抽滤，重复上述操作3次;药渣50%乙醇浸没，热冷凝回流1 h，抽滤，重复3次。合并滤液，用旋转蒸发仪浓缩。再加适量蒸馏水使浓缩物完全溶解，置6 000 ml的锥形瓶中，加石油醚1 000 ml振摇1 h，然后离心15 min(6 000 r/min)，取上层液体，如此重复5次;剩下部分用醋酸乙酯、正丁醇、蒸馏水重复石油醚操作。所得的石油醚(为1号)、醋酸乙酯(为2号)、正丁醇(为3号)、水溶性组分(为6号)旋转蒸发仪浓缩，45℃烘干后置冰箱备用。益母草流浸膏经烤箱60℃烘干，固体经磨粹后放入磨口玻璃瓶备用。

试剂：石油醚由广州化学制剂厂出品(批号20040501);乙酸乙酯购自广东精密化学品公司(批号20050203);正丁醇购自广东光华化学厂有限公司(批号20040717);益母草流浸膏为桂林漓江益佰制药厂产品(批号20050617)。

1.2 仪器SYC-15超级恒温水浴(北京桑力电子设备厂);旋转蒸发器(郑州长城科工贸有限公司);BL-410生物机能实验系统(成都泰盟电子有限公司)。

1.3 动物昆明种小鼠、Wistar大鼠、家兔、豚鼠均由桂林医学院动物室提供。

1.4 动物离体子宫标本的制备取正常或经产未孕小鼠、大鼠、豚鼠和家兔，脱颈椎处死后剖腹取出子宫，立即置于盛有营养液(小鼠用Tyrode[2]氏液、大鼠用DeJaion氏液[3]、家兔用Krebs氏液[2]、豚鼠用Van Dyke-Hasting[2]氏液)的玻璃皿中，剥离子宫壁上附着脂肪组织，将一侧子宫角的两端分别用线结扎，按文献方法[4]一端固定于通气钩上，另一端连接在张力换能器(小鼠、大鼠和豚鼠用0～3 g，家兔用5 g张力换能器)上，置于含30ml营养液的麦氏浴槽，通入氧气，每秒通1～2个小气泡，麦氏浴槽恒温在(37±0.5)℃，张力换能器连于BL-410生物信号采集系统，调零、定标。增益调节G=50，时间常数T=DC，滤波调节F=30Hz，扫描速度S=16.00s/div[4]。稳定10 min后，进行实验。

1.5 给药方法待标本稳定10 min后，加入正丁醇组分(0.1 g/ml)不同剂量，先测出兴奋子宫的最低有效量，然后按最低有效量依次增加剂量，直至子宫收缩达到最大效应，每次加药后观察和记录10min离体子宫收缩活动，更换营养液，冲洗3次，再加下一个浓度。小鼠最终浓度为0.16～3.3 mg/ml，大鼠最终浓0.33～3.3 mg/ml，家兔最终浓度为0.33～2.00 mg/ml，豚鼠最终浓度为0.03～0.40 mg/ml。水溶性组分、益母草流浸膏组分均按上述方法操作。

2 结果

2.1 对小鼠、大鼠离体子宫平滑肌的影响

正常或经产未孕小鼠、大鼠各8只，3号与6号均能引起大鼠、小鼠离体子宫兴奋，使小鼠、大鼠离体子宫收缩频率、收缩振幅和收缩张力增加。大鼠子宫在剂量大于2.67 mg/ml时出现强直，小鼠子宫在剂量大于2.00 mg/ml时出现强直，并维持20 min以上，用营养液冲洗后子宫可复原。结果见图1～2。小鼠在最终浓度为0.16～3.3 mg/ml的浓度范围内呈量-效关系，大鼠子宫在最终浓度为0.33～3.3 mg/ml的浓度范围内呈量-效关系，在无自动节律收缩的子宫肌段，3号、6号均可使小鼠、大鼠离体子宫产生节律性地收缩。注射己烯雌酚后的小鼠(0.2 mg/kg)、大鼠(0.5 mg/kg)上述作用更为明显。结果见图3～4。

益母草流浸膏浓缩物无论对孕或非孕大鼠、小鼠离体子宫作用不明显。

2.2 对妊娠家兔离体子宫平滑肌的影响妊娠家兔4只，共实验4次，结果一致， 3号与6号均能引起家兔子宫的兴奋，使子宫肌的收缩频率、收缩振幅和收缩张力增加。在最终浓度为0.33～2.00 mg/ml的浓度范围内呈量-效关系。结果见图5～6。

2.3 对正常豚鼠离体子宫平滑肌的影响未孕成年豚鼠8只，小剂量最终浓度为0.03 mg/ml，就能引起豚鼠离体子宫的兴奋，使无自主收缩的子宫出现收缩。随着剂量的增加，离体子宫的收缩频率和幅度加快和增强。在剂量大于最终浓度为0.33 mg/ml时出现强直，这表明豚鼠对3号和6号更为敏感。结果见图7～8。

2.4 计算EC50以每次加入药物后兴奋子宫平滑肌的最大效应为100%，求出药物兴奋子宫的量效关系，以振幅的百分数为y轴，以最终浓度为x轴，代入回归方程y=ax+b，经计算机(Windows98, Microsoft Excel数据分析工具)求出a和b，再求出平均50%的效应即EC50。结果见表1。表1 正丁醇组分和水溶性组分及益母草流浸膏对不同动物离体子宫的EC50(略)

3 讨论

实验结果表明，棕叶花正丁醇组分、水溶性组分均能使非孕或注射己烯雌酚后大鼠、小鼠、豚鼠、家兔离体子宫平滑肌的收缩频率增快、收缩幅度增强、张力明显提高，提示这两种提取物均含有兴奋子宫平滑肌的活性物质。通过水溶性组分、正丁醇组分对小鼠、大鼠离体子宫EC50的比较，前者兴奋子宫作用比后者稍强(见表1)，提示活性物质在水溶液中含量比在正丁醇稍多。通过注射己烯雌酚后的比较(见表1)，其结果表明雌激素对两种组分的子宫平滑肌兴奋有增强作用;与益母草流浸膏EC50的比较，其兴奋子宫作用明显强于益母草(P<0.05)，其中对豚鼠子宫的兴奋作用最强(P<0.01)。而石油醚、醋酸乙酯组分对离体子宫兴奋作用微弱。

棕叶花除了对子宫有兴奋作用外，其植物其他部分是否有兴奋子宫作用尚需进一步研究，对正丁醇和水溶性组分中的活性物质有待进一步分离提纯和鉴定。